Hướng dẫn chạy sắc ký cột

Sắc ký cột thường được sử dụng để tinh chế các chất Một mẫu không tinh khiết được nạp vào cột chất hấp phụ, chẳng hạn như silica gel hoặc alumina. Một dung môi hữu cơ hoặc hỗn hợp dung môi (dung môi rửa giải) chảy xuống qua cột. Các thành phần của mẫu tách biệt với nhau bằng cách phân chia giữa vật liệu đóng gói đứng yên (silica hoặc alumina) và dung dịch rửa giải pha động.

Nhồi cột (silica gel pha thường hoặc pha đảo):

Cho miếng bông vào phần dưới cùng của cột. Cần có đủ bông để silica không đi qua cột. Tuy nhiên, quá nhiều bông hoặc bông được đóng gói quá chặt sẽ ngăn không cho dung môi đi qua.

Kẹp cột vào giá đỡ vòng và thêm chất nhồi vào cột.

Ngâm silica trong dung môi pha động khoảng trên 2 giờ, chú ý khuấy cho dung môi thấm hết vào silica. Chú ý cẩn thận tránh hít phải silica rất nhẹ, nên làm trong tủ hút.

Tiếp theo khuấy và đổ lớp bùn silica lên cột, cho đến chiều cao vừa đủ. Bạn có thể dùng một thìa sạch hoặc que thủy tinh vừa khuấy vừa đổ silica.

Tháo kẹp hoặc mở khóa cho dung môi nhỏ giọt vào bình sạch. Thêm dung môi pha động, tiếp tục cho chảy cho đến khi silica giữ chặt trong cột.

Sử dụng pipet Pasteur để rửa bất kỳ silica nào dính vào các cạnh của cột. Cho phép silica lắng trong khi dung môi tiếp tục nhỏ giọt vào bình (khi silica đã lắng xuống có thể thêm cát vào đỉnh cột. Cát nặng hơn silica. Nếu silica chưa lắng xuống, cát có thể chìm vào silica thay vì tạo thành một lớp trên nó. Chú ý lớp silica bề mặt phải phẳng, nếu không chất sẽ không thể tách tốt.

Cho mẫu lên cột

Cho dung môi rửa giải trên cột chảy cho đến khi không còn dung môi trên bề mặt.

Sử dụng pipet Pasteur dài, cẩn thận thêm mẫu của bạn vào cột. (Hoặc thường dùng hơn, pha mẫu trong dung môi MeOH, sau đó cho silica pha thường một lượng vừa đủ, sau đó cho cô quay trên máy cô quay chân không cho hết dung môi. Cho dung môi lên cột một lượng vừa phải, đủ để thấm hết silica chứa mẫu trên cột, sau đó cho silica mẫu lên cột)

Dùng pipet thêm dung môi vào cột, cho sạch các hạt dính ở thành, chú ý không làm xáo trộn mẫu.

Rửa giải mẫu:

Cho từ từ dung môi lên cột, tránh làm xáo trộn silica, có thể dùng bông để sát bề mặt để tránh xáo trộn khi đổ trực tiếp. Nếu chạy gradient tăng dần độ phân cực của dung môi. Chú ý đối với silica gel pha thường nếu dung môi pha động chứa nhiều nước không được để cột quá lâu, do nước có thể hòa tan silica gel.

Chú ý ​​khác:

Thành công của sự phân tách phụ thuộc vào sự lựa chọn dung môi pha động, cách nhồi cột và chạy cột. Bề mặt cột phải bằng phẳng giúp các chất giống nhau ra cùng nhau. Tốc độ chảy của dung môi pha động không được nhanh quá, các chất sẽ không đủ thời gian trải qua sự phân bố cấu tử dẫn đến tách không hiệu quả. Để giảm tốc độ dòng có thể nhồi chặt bông trong đầu tip gắn qua ống silicol. Dung môi chính là methylen chloride có tốc độ chạy nhanh, các dung môi khác có tốc độ vừa phải.

 

 

 

Giới thiệu: Sản phẩm Nhựa hấp phụ Macroporous D101 là một copolymer không phân cực loại styrene (tác nhân liên kết chéo là divinylbenzene, porogen là toluene và octanol). Nó có một loạt các ứng dụng. Đối với các hợp chất hữu cơ không phân cực hoặc phân cực yếu, nó có khả năng hấp phụ mạnh, đặc biệt là để tách và phân lập saponin. Nó cũng thích hợp cho flavonoid và alkaloid. Ví dụ: ginsenoside, Panax notoginseng saponin, diosgenin, ginkgo flavone.

Ứng dụng: Sử dụng để tinh chế các sản phẩm Ginsenoside, Panax notoginseng saponin, diosgenin và ginkgo flavone.

Thông số sản phẩm:

Độ ẩm: 65-75 (%).

Mật độ thực: 1.15-1.19 (g/ml).

Kích thước: 0.315-1.25mm

Bề mặt: Hình cầu

Đơn vị đóng gói: 0.8 Kg

Xuất xứ: YUNKAI – Trung Quốc

Đặt hàng ấn vào đây  ĐẶT HÀNG NHỰA HẤP THỤ d101

Để lại một bình luận

Email của bạn sẽ không được hiển thị công khai. Các trường bắt buộc được đánh dấu *